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TSKgel Chelate-5PW亲和色谱柱

 
品牌: TSK-GEL
内径:: 21.5mm7.5mm
粒径:: 10µm
温度:: <45℃
单价: 面议
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发货期限: 自买家付款之日起 天内发货
所在地: 进口
有效期至: 2024-04-22
最后更新: 2021-11-25 08:56
浏览次数: 85
 
公司基本资料信息
详细说明

通过亚氨基二乙酸(IDA)基团共价键合到G5000PW聚合物基质上形成的TSKgel Chelate-5PW色谱柱。在亲和色谱之前将金属离子例如Zn2+、Ni2+或Cu2+,螯合到IDA基团上,金属离子结合在IDA基团上的三个配位点。因此,目标分子能够紧密地结合在金属离子的三个游离结合位点。由于结合的金属离子浓度很高(每mL凝胶为20μmol金属离子),TSKgel Chelate-5PW色谱柱对于目标分子有很高的结合力。

肽和蛋白质中的组氨酸残基在中性pH条件下通常会吸附到这些螯合离子上。使用含有咪唑或甘氨酸的缓冲液进行蛋白质解吸。成功利用这种保留机制的关键是选择合适的金属离子和洗脱缓冲液。Cu2+与蛋白质的相互作用更加强烈,Zn2+通常能提高分辨率。使用Zn2+时,色谱柱为饱和载量,而结合较强的Cu2+的载量大约为总量的一半。蛋白的洗脱通常通过梯度增加咪唑或甘氨酸浓度,或者梯度降低pH值来进行。甘氨酸(HEPES缓冲液中)是一种强洗脱液,也可以解吸金属离子,因此有必要在每次分析结束后对色谱柱进行再生。咪唑(磷酸盐缓冲液中)是一种弱洗脱液,有必要在色谱柱运行多次以后再生。

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